Hetalia: The World Twinkle kontynuuje pełną humoru i satyry podróż przez historię świata, przedstawiając kraje jako barwne postacie o wyrazistych osobowościach. Ponownie spotkamy się z beztroskimi i sympatycznymi narodami jak Włochy, Niemcy, Japonia czy Stany Zjednoczone, a także ich nietypowymi sposobami na przedstawienie historycznych oraz kulturalnych faktów w przystępny sposób. W krótkich, dowcipnych epizodach bohaterowie prezentują zabawne interakcje, drobne nieporozumienia oraz specyficzne różnice pomiędzy poszczególnymi państwami, które często prowadzą do komicznych efektów. Anime utrzymane jest w lekkim, autoironicznym nastroju, nie stroniąc od przyjacielskiego żartu z narodowych stereotypów, jednocześnie przypominając, jak niewinne nieporozumienia mogą prowadzić do absurdalnych sytuacji.
