Mario i Luigi to dwaj zwykli hydraulicy prowadzący spokojne życie, którym nieoczekiwanie przytrafia się niezwykła przygoda. Pewnego dnia Mario spotyka tajemniczą księżniczkę Peach, która błaga go o pomoc przed złowrogim królem Koopą. Nagle księżniczka zostaje porwana do magicznej krainy Grzybowego Królestwa. Mario wraz ze swoim bratem Luigim muszą wyruszyć na pełną niebezpieczeństw wyprawę w celu ocalenia księżniczki i pokonania podstępnego Koopy. Po drodze bohaterowie napotkają nowych sprzymierzeńców i groźnych przeciwników, przemierzając kolorowe, fantastyczne lokacje. To familijny, pełen humoru film przygodowy oparty na legendarnej grze od Nintendo. Mario i Luigi zmierzą się z wieloma przeciwnościami losu, aby odzyskać spokój Grzybowego Królestwa i uratować księżniczkę Peach.